Предметом деятельности музея является обеспечение доступа граждан к государственным и муниципальным музейным фондам, осуществление просветительской и образовательной деятельности.

Научно-исследовательская работа в музее - одно из ведущих направлений деятельности музея, связанное с накоплением, обработкой и введением в научный и общекультурный оборот материальных и нематериальных объектов наследия. Научные сотрудники ведут деятельность по изучению музейных предметов и коллекций, занимаются исследованиями в области сохранения памятников культуры, изучением объектов нематериального культурного наследия.

Научно-просветительная работа в МБУК «Музей истории города Новокуйбышевска» для привлечения посетителей различных возрастных категорий, социального статуса и интересов предполагает такие специфические формы работы, как экскурсии по стационарным экспозициям и выставкам, тематические экскурсии, театрализованные и костюмированные экскурсии, пешеходные и автобусные экскурсии по городу, образовательные  программы, лекции,  интерактивные беседы, мастер-классы и т.д.